操作流程：
1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。

產品參數(shù)：
產品名稱：熱帶利什曼原蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Leishmania tropica
產品規(guī)格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
熱帶利什曼原蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
人癌細胞;MDA-MB-453牛白蛋白，英文名或英文縮寫：BSA，級別：精制級，350-600u/mg，芬末，規(guī)格：25克

NCI-H661細胞，大細胞細胞 人細胞,HONE1細胞 CL-0301M-NFS-60 (小鼠細胞G-CSF依賴性)5×106cells/瓶×23,4-三拂本硼醋 3,4,5-Trifluorophqnylboronic ccid 143418-49-9

中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1SSCBUFFER,20X,WITH1%SARCOSYL SSC,含 1% 十二烷基肌酸鈉超級透明無色液體RTsigma

PDCD1 Others Mouse 小鼠 PD1 / PDCD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 激動素，英文名或英文縮寫：6-KT，級別：USP級，95%，規(guī)格：1克

膀胱平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)21645-51-2氫氧化鋁AluMiniuM xy7noxide;Hydrated aluMina;AluMinuM trihydrate
NHEM.f-c 正常人表皮素細胞(NHEM)少年者 500,000cells 視網膜muller細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)metxyllinolenate順-9，12，15-十八碳三1酸500克AR，45%

膠原I-3D凝膠試劑盒C3DGKβ- β-Alanine,99% 107-95-9 500G 通用試劑

F11R Others Rat 大鼠 JAM-A / F11R 人細胞裂解液 (陽性對照) 雙環(huán)務烷六拂鱗醋鐵 FqRROCqNIUM HqXcFLUOROPHOSPHcTq 11077-4-0

人視網膜微內皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL頭孢菌素Ⅳ，英文名或英文縮寫：Cephalexin monohydrate，級別：BR，500u/mg，規(guī)格：1毫克

FAT細胞，大鼠細胞 SHZ-88(大鼠癌細胞) 大額牛肺細胞;BFR-L17758-97-6酸　Lead chromate
CL-0149MCF-7(人癌細胞)5×106cells/瓶×2蔗糖1酸化酶Sucrose phosphorylase from L. Mesenteroides質量規(guī)格：BC Grade

NIH/3T3細胞，鼠成纖維細胞系 人Butts瘤細胞系,CA46細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1磺胺二甲嘧啶鈉(>99%,BP)Sulfamethazine  salt質量規(guī)格：>99%,BP

Anglne(人細胞) 5×106cells/瓶×2磺溴酞鈉(>98%,BR)Sulfobromophthalein di salt hydrate質量規(guī)格：>98%,BR

CXCL12 Others Human 人 CXCL12 / SDF1b 人細胞裂解液 (陽性對照) Sulfo-MBSSulfo-MBS質量規(guī)格：BR

豬腎傳代細胞;IBRS-2四庚基溴化銨(>98%,BC)Tetraheptylammonium bromide質量規(guī)格：>98%,BC
熱帶利什曼原蟲探針法熒光定量PCR試劑盒CM-H021人平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL氘代DMSO-D6(0.5ml x 10)Dimethyl Sulfoxide-D6質量規(guī)格：D,99.8%+TMS 0.03%

Lncap細胞，細胞 膀胱變移細胞癌細胞,T-24細胞 人胚腎細胞;293 Cells, low passage氘代DMSO-D6(0.5ml x 10)Dimethyl Sulfoxide-D6質量規(guī)格：D,99.9%

615小鼠株;Ca763氘代DMSO-D6(0.6ml x 10 )Dimethyl Sulfoxide-D6質量規(guī)格：D,99.8%+TMS 0.03%

TIGIT Others Human 人 TIGIT / VSTM3 人細胞裂解液 (陽性對照) 氘代DMSO-D6(0.6ml x 10 )Dimethyl Sulfoxide-D6質量規(guī)格：D,99.9%

人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN氘代DMSO-D6(10 g )Dimethyl Sulfoxide-D6質量規(guī)格：D,99.8%+TMS 0.03%
注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。