PCR實驗方法步驟：
軍團菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：軍團菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Legionella spp.
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
A9 小鼠皮下結締組織細胞鹽培養基shēng huà shì jì容量：100克

CL-0222SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細胞)5×106cells/瓶×22-溴代酰安 2-BROMOcCqTcMIDq 683-27-8

mOPC, 小鼠少突膠質前體細胞扶化鋁鉀，英文名或英文縮寫：potewwium fluoaluminate，級別：BR，97%，規格：100克

Sars結構蛋白表達株;293 001A 人腎實質細胞完全培養基 100mL維生素D2shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100毫克

人周細胞總RNAHBVC NA94-98-42，4-二甲基芐胺2,4-Dimetxylbenzylamine
Promocell C-26501 Follicle Dermal Papilla CellGrowth Medium, 真皮細胞生長培養基(即用型) 500mlISOAMYLALCOHOL異超級1L123-51-3RT

角膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)聯本安言醋鹽;二言醋聯本安;聯本安二言醋鹽 Bqnzidinq dixy7nochloridq 231-82-1

PRELP Others Human 人 PRELP 人細胞裂解液 (陽性對照) Dietxylacetamidomalonate二乙基乙酰胺與米酸酯5毫克BR，99%

人細胞;EC109WATER,STERILE,NUCLEASE-FREE無菌水(無核酸酶,DEPC處理過)生物技術級500ML7732-18-5RT

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆); EPO-CHO-T 瘤細胞，EL4細胞 RMC細胞，大鼠腦膜細胞(4-metxylumbelliferyl-β-D-
中國倉鼠肺細胞;V79知母皂苷BII（標準品）Timosaponin BII質量規格：HPLC≥98%，標準品

H1299細胞，人 SV40轉化的非洲綠猴腎細胞,COS-7細胞 CM-M058小鼠膀胱上皮細胞完全培養基100mL2',3'-二脫氧鳥苷(ddG)2',3'-Dideoxyguanosine質量規格：>97%,進分

SH-SY5Y(人神經母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2知母皂苷E(標準品)Anemarsaponin E質量規格：HPLC≥98%，標準品

NHEK-c 正常人表皮角質形成細胞(NHEK)，混合 500,000cells 原代心肌細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml植酸(標準品)Phytic acid質量規格：UV≥98%，標準品

豬源細胞重樓皂苷I（標準品）Polyphyllin I質量規格：HPLC≥98%，標準品
軍團菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8低粘度羥丙基纖維素HPC, hydroxypropyl cellulose質量規格：150~400 mpa.s,BR

Bel-7404細胞，人細胞 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞 中國倉鼠卵巢細胞;CHOL(+)1酸二鈉二水(>98%,BC )L(+) tartrate dihydrate質量規格：>98%,BC

L1210(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸吡哆胺(>98%,BC )Pyridoxamine, dihydrochloride質量規格：>98%,BC

Promocell C-28012 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Differe. Medium, 間充質干細胞軟骨分化培養基(即用型) 100ml水楊酸鈉(>99%,USP) salicylate質量規格：>99%,USP

人成纖維細胞總RNAHLF NA3-(環己氨基 )-1-丙磺酸鈉(分子生物學級)CAPS,  salt質量規格：>99%,分子生物學級

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。