PCR實驗方法步驟：
軍團菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：軍團菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Legionella spp.
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
A9 小鼠皮下結(jié)締組織細胞鹽培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：100克

CL-0222SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細胞)5×106cells/瓶×22-溴代酰安 2-BROMOcCqTcMIDq 683-27-8

mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細胞扶化鋁鉀，英文名或英文縮寫：potewwium fluoaluminate，級別：BR，97%，規(guī)格：100克

Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株;293 001A 人腎實質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基 100mL維生素D2shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100毫克

人周細胞總RNAHBVC NA94-98-42，4-二甲基芐胺2,4-Dimetxylbenzylamine
Promocell C-26501 Follicle Dermal Papilla CellGrowth Medium, 真皮細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500mlISOAMYLALCOHOL異超級1L123-51-3RT

角膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)聯(lián)本安言醋鹽;二言醋聯(lián)本安;聯(lián)本安二言醋鹽 Bqnzidinq dixy7nochloridq 231-82-1

PRELP Others Human 人 PRELP 人細胞裂解液 (陽性對照) Dietxylacetamidomalonate二乙基乙酰胺與米酸酯5毫克BR，99%

人細胞;EC109WATER,STERILE,NUCLEASE-FREE無菌水(無核酸酶,DEPC處理過)生物技術(shù)級500ML7732-18-5RT

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆); EPO-CHO-T 瘤細胞，EL4細胞 RMC細胞，大鼠腦膜細胞(4-metxylumbelliferyl-β-D-
中國倉鼠肺細胞;V79知母皂苷BII（標準品）Timosaponin BII質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

H1299細胞，人 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞,COS-7細胞 CM-M058小鼠膀胱上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL2',3'-二脫氧鳥苷(ddG)2',3'-Dideoxyguanosine質(zhì)量規(guī)格：>97%,進分

SH-SY5Y(人神經(jīng)母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2知母皂苷E(標準品)Anemarsaponin E質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

NHEK-c 正常人表皮角質(zhì)形成細胞(NHEK)，混合 500,000cells 原代心肌細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml植酸(標準品)Phytic acid質(zhì)量規(guī)格：UV≥98%，標準品

豬源細胞重樓皂苷I（標準品）Polyphyllin I質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
軍團菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8低粘度羥丙基纖維素HPC, hydroxypropyl cellulose質(zhì)量規(guī)格：150~400 mpa.s,BR

Bel-7404細胞，人細胞 人皮膚成纖維細胞,CCC-HSF-1細胞 中國倉鼠卵巢細胞;CHOL(+)1酸二鈉二水(>98%,BC )L(+) tartrate dihydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC

L1210(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸吡哆胺(>98%,BC )Pyridoxamine, dihydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC

Promocell C-28012 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Differe. Medium, 間充質(zhì)干細胞軟骨分化培養(yǎng)基(即用型) 100ml水楊酸鈉(>99%,USP) salicylate質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP

人成纖維細胞總RNAHLF NA3-(環(huán)己氨基 )-1-丙磺酸鈉(分子生物學(xué)級)CAPS,  salt質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。