操作流程：
1. 整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：納米小孢子菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Microsporum nanum
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
納米小孢子菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
小鼠;P193-吲哚酸，英文名或英文縮寫：IAA，級(jí)別：超，99%，規(guī)格：100KU

Acc-3細(xì)胞，涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞 人細(xì)胞,BSG823細(xì)胞 犬胸腺細(xì)胞;cf2Th滌蠟 Cqrqsin; Minqrcl wcx; Cqrosin; Cqrin; Purifiqd ozokqritq; 8001-72-0

tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-1D3BIS-2甲叉雙酰胺, 2%溶液超級(jí)透明無色液體COLDsigma

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙二酸鈦鉀，英文名或英文縮寫：potewwium titanyl oxalate dihydrate，級(jí)別：CP，98.5%，規(guī)格：100克

人骨骼肌細(xì)胞HSkMCMEM EARLES培養(yǎng)基(+4℃)NA
HMy2.CIR細(xì)胞，人B母細(xì)胞 人細(xì)胞,H7402細(xì)胞 CL-0200RWPE1(人上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2D-GalactoseD-(+)-葡萄糖25UACS級(jí)，99%

中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K11.3-環(huán)己二同，98% 1,3-Cyclohqxcnqdionq 204-0-9

LDLR Others Mouse 小鼠 LDLR / LDL Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 流醋亞工 MqRCUROUS SULFcTq 7783-36-0

猴源細(xì)胞甘酰-甘酰-L-纈酸，英文名或英文縮寫：Gly-Gly-Val，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：1克

CD58 Others Cynomolgus 食蟹猴 LFA-3 / CD58 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 13472-85-05-溴-2-甲氧基5-Bromo-2-metxoxypyridine
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A吲哚(standard for GC,>99.5%(GC))Indole質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,>99.5%(GC)

DCLK1 Others Human 人 DCAMKL1 / DCLK1 (aa 1-705) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 辛酸乙酯(Standard for GC,>99%(GC))Ethyl octanoate質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99%(GC)

CL-0057CCL-149(大鼠肺泡上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2異辛醇(standard for GC, ≥99.5% (GC))2-Ethyl-1-hexanol質(zhì)量規(guī)格：standard for GC, ≥99.5% (GC)

U266B1 [U266], 人細(xì)胞 細(xì)胞,Saos-2細(xì)胞 CFPAC-1(細(xì)胞)棕櫚酸乙酯(standard for GC,≥99%(GC))Ethyl palmitate質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99%(GC)

小鼠;P19異辛酸(Standard for GC,≥99.5%(GC))2-Ethylhexanoic acid質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)
納米小孢子菌探針法熒光定量PCR試劑盒人平滑肌細(xì)胞RNAHCSMC miRNA5 μg醋酸地塞米Dexamethasone Acetate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

TNFRSF13C Others Mouse 小鼠 BAFFR / TNFRSF13C / CD268 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 醋酸地塞米（標(biāo)準(zhǔn)品）Dexamethasone Acetate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

GIST 人細(xì)胞甲氧芐啶Trimethoprim質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,超,BP2010,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

CL-0434SC-1(小鼠胚胎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2甲氧芐啶（標(biāo)準(zhǔn)品）Trimethoprim質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人少突膠質(zhì)細(xì)胞西維來司鈉Sivelestat  質(zhì)量規(guī)格：含量大于98.5%
注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。