PCR實驗方法步驟：
梅克爾多元癌細胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：梅克爾多元癌細胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Merkel Cell Polyomavirus(MCPyV)
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
大鼠腦細胞;C6SDS(wo7iumDODECYLSULFATE),10%SOLUTIONSDS溶液超級透明無色液體RTsigma

雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6 小鼠脈絡膜細胞完全培養基 100mL二異脲酸鈉  dichloroisocyanurate,96% 2893-78-9 100G 通用試劑

HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞 Humanα-1,6 葡聚糖 GLYCOGqN 9002-79-

EFNA1 Others Mouse 小鼠 EFNA1 / Ephrin-A1 人細胞裂解液 (陽性對照) 粘液素II，英文名或英文縮寫：Mucin，級別：BR，200u/mg，規格：1公斤

人紅系細胞;TF-1姆沙伯 W NAWChromosorb W-NAW
滑膜細胞培養基SMIEFCATHODEBUFFER,20XIEF陰極緩沖液, 20X蛋白組學級透明淡黃色液體RTsigma

PRAP1 Others Human 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人細胞裂解液 (陽性對照) 1，3-本二流醇 1,3-BqNZqNqDITHIOL 66-04-0

人細胞;1301三拂醋工 Mqrcuric trifluoroccqtctq 1327-21-7

大鼠胰島細胞瘤細胞;INS-1 神經上皮瘤細胞，SK-N-MC細胞 MPC細胞，小鼠垂體細胞4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖苷，英文名或英文縮寫：MUD，級別：BR，規格：100克

HT-29, 人細胞 Human617-45-8DL-天冬酸;DL-天冬酸;DL-天門冬酸;DL-基丁二酸;DL-基琥珀酸DL-Aspartic acid
SMMC-7721人細胞 SMMC-7721 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS吲哚美辛Indometacin質量規格：>99%,AR,BP2010

RSPO1 Protein Mouse 重組小鼠 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白 (His 標簽)吲哚美辛（標準品）Indometacin質量規格：HPLC>98%,標準品

人平滑肌細胞 (HBSMC)( 5×105 ) MA, 小鼠星形膠質細胞 Mouse西米替汀Cimetidine質量規格：>99%,USP32,A型

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163西米替汀（標準品）Cimetidine質量規格：HPLC>98%,標準品

RAB27B Others Human 人 RAB27B 人細胞裂解液 (陽性對照) 阿德福韋/阿德福韋酯Adefovir dipivoxil質量規格：>99%,可用于細胞培養
梅克爾多元癌細胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒CM-H091人大隱內皮細胞完全培養基100mL醋酸高(>95%,BC)Lead (IV) acetate質量規格：>95%,BC

GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤粉(>99%,BC)Lead powder質量規格：>99%,BC

人癌細胞;MDA-MB-435S 人視網膜微內皮細胞完全培養基 100mL堿式碳酸(>99%,BR)Lead(II) carbonate basic質量規格：>99%,BR

人平滑肌細胞總RNAHCSMC NA雷氏曼著色劑Leishman's stain質量規格：BS

PVRL2 Others Rat 大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細胞裂解液 (陽性對照) 來普霉素B 1%溶液Leptomycin B 1% soluton質量規格：>95%(HPLC),BC

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。