產品參數：
產品僅供科研使用產品名稱：羅布羅布芽生菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Loboa lobai
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
羅布羅布芽生菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
大鼠腸平滑肌細胞完全培養基 100mL變色硅膠5KU

HSF人皮膚成纖維細胞 HSF in human skin fibroblasts DMEM+10%FBS或者(進口的新生牛血清NCS)2,4,5-三拂本醋 2,4,5-Trifluorophqnylccqtic ccid 09992-38-0

EGF Protein Human 重組人 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白2-()乙磺酸200微升/支保存：-20℃

Y3-Ag 1.2.3(大鼠細胞) 5×106cells/瓶×2 原代內皮細胞特制基礎培養基Many types of cells包裝：500/250/100mlDNAzol提取試劑100克RT，避光

人顱骨造骨細胞總RNAHCO NA6165-68-02-硼酸2-Thiopxeneporonic acid
EB病毒轉化的人B細胞;KM0501PCRDNAMARKERDNA Marker生物技術級透明液體FROZENsigma

SAC-IIB2細胞，腹水瘤細胞 人細胞,Colo320DM細胞 CM-H004人肺大內皮細胞完全培養基100mL3-氧基芐安 3-Mqthoxybqnzylcminq 2071-96-2

大鼠肝細胞瘤;H-4-II-ECALCIUMPHOSPHATE,DIBASIC,DIHYDRATE嶙酸氫鈣,二水*白色精細粉末RTsigma

MME Others Mouse 小鼠 MME / CD10 / NEP 人細胞裂解液 (陽性對照) TRYPTOnepROTH,POWDER胰蛋白胨肉湯生物技術級顆粒粉末RT不sigma

間充質干細胞培養基MSCM-acf;1,4-二羥基丁烷9,4-putene7iol;1,4-Dixy7noxybutane;Tetrametxylene glycol
人腸平滑肌細胞(HISMC)( 5×105 ) RA, 大鼠星形膠質細胞 Rattus遠華蟾蜍精(標準品)Telocinobufagin質量規格：HPLC≥98%，標準品

豬晶狀體上皮細胞PlEpiC日蟾蜍他靈;和蟾毒他靈(標準品)Gamabufotalin質量規格：HPLC≥98%，標準品

EGFR Others Rat 大鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 人細胞裂解液 (陽性對照) 蟾毒它靈(標準品)Bufotaline質量規格：HPLC≥98%，標準品

大鼠腮腺細胞完全培養基 100mL黃尿酸Xanthurenic Acid質量規格：>95%,進口

NCI-H23人非小細胞細胞 NCI-H23 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS舒巴坦酸Sulbactam Acid質量規格：>99%,BR
羅布羅布芽生菌探針法熒光定量PCR試劑盒EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人細胞裂解液 (陽性對照) 單硝酸異山梨酯Isosorbide 5-mononitrate質量規格：含量測定

人晶狀體上皮細胞總RNAHLEpiC NA單硝酸異山梨酯Isosorbide 5-mononitrate質量規格：>98%,BR

KLRC1 Others Cynomolgus 食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-單硝酸異山梨酯（標準品）Isosorbide 2-nitrate質量規格：檢查用

貓星形腦膠質細胞;PG-4(S+L-)依那普利雙酮（標準品）XX質量規格：檢查用

PC-3細胞，人細胞 人表皮癌細胞,A-431細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3依那普利拉（標準品）Enalaprilat質量規格：檢查用