產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：羅布羅布芽生菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Loboa lobai
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
羅布羅布芽生菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
大鼠腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL變色硅膠5KU

HSF人皮膚成纖維細(xì)胞 HSF in human skin fibroblasts DMEM+10%FBS或者(進(jìn)口的新生牛血清NCS)2,4,5-三拂本醋 2,4,5-Trifluorophqnylccqtic ccid 09992-38-0

EGF Protein Human 重組人 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白2-()乙磺酸200微升/支保存：-20℃

Y3-Ag 1.2.3(大鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 原代內(nèi)皮細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100mlDNAzol提取試劑100克RT，避光

人顱骨造骨細(xì)胞總RNAHCO NA6165-68-02-硼酸2-Thiopxeneporonic acid
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KM0501PCRDNAMARKERDNA Marker生物技術(shù)級透明液體FROZENsigma

SAC-IIB2細(xì)胞，腹水瘤細(xì)胞 人細(xì)胞,Colo320DM細(xì)胞 CM-H004人肺大內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL3-氧基芐安 3-Mqthoxybqnzylcminq 2071-96-2

大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-ECALCIUMPHOSPHATE,DIBASIC,DIHYDRATE嶙酸氫鈣,二水*白色精細(xì)粉末RTsigma

MME Others Mouse 小鼠 MME / CD10 / NEP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) TRYPTOnepROTH,POWDER胰蛋白胨肉湯生物技術(shù)級顆粒粉末RT不sigma

間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基MSCM-acf;1,4-二羥基丁烷9,4-putene7iol;1,4-Dixy7noxybutane;Tetrametxylene glycol
人腸平滑肌細(xì)胞(HISMC)( 5×105 ) RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞 Rattus遠(yuǎn)華蟾蜍精(標(biāo)準(zhǔn)品)Telocinobufagin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

豬晶狀體上皮細(xì)胞PlEpiC日蟾蜍他靈;和蟾毒他靈(標(biāo)準(zhǔn)品)Gamabufotalin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

EGFR Others Rat 大鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 蟾毒它靈(標(biāo)準(zhǔn)品)Bufotaline質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠腮腺細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL黃尿酸Xanthurenic Acid質(zhì)量規(guī)格：>95%,進(jìn)口

NCI-H23人非小細(xì)胞細(xì)胞 NCI-H23 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS舒巴坦酸Sulbactam Acid質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
羅布羅布芽生菌探針法熒光定量PCR試劑盒EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 單硝酸異山梨酯Isosorbide 5-mononitrate質(zhì)量規(guī)格：含量測定

人晶狀體上皮細(xì)胞總RNAHLEpiC NA單硝酸異山梨酯Isosorbide 5-mononitrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

KLRC1 Others Cynomolgus 食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-單硝酸異山梨酯（標(biāo)準(zhǔn)品）Isosorbide 2-nitrate質(zhì)量規(guī)格：檢查用

貓星形腦膠質(zhì)細(xì)胞;PG-4(S+L-)依那普利雙酮（標(biāo)準(zhǔn)品）XX質(zhì)量規(guī)格：檢查用

PC-3細(xì)胞，人細(xì)胞 人表皮癌細(xì)胞,A-431細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/C 3T3依那普利拉（標(biāo)準(zhǔn)品）Enalaprilat質(zhì)量規(guī)格：檢查用