PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
李斯特菌通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：李斯特菌通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
英文名稱：Listeria spp.
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
豚鼠心肌細(xì)胞;GP-H1曲拉通x-1145克2～8℃

3T6-Swiss albino細(xì)胞，胚胎成纖維細(xì)胞 人細(xì)胞,CaPan-Ⅱ/Capan-2細(xì)胞 CM-M040小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL縮水甘油三基錄化銨(+4℃) 2,3-qpoxypropyltrimqthylcmmonium chloridq 3033-77-0

正常大鼠腎細(xì)胞;NRK對(duì)本100毫克

CDH6 Others Human 人 CDH6 / KCAD 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 三號(hào)膽鹽5克RT，避光

人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞cDNAHCPF cDNA2-脫氧胞苷-5-三1酸鈉鹽(+4℃)NA
HNE1細(xì)胞，人細(xì)胞 小鼠細(xì)胞,FO細(xì)胞 CM-H006人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLAGAROSEI/TAEBLEND1.5%瓊脂糖 - TAE 混合物 1.5%生物技術(shù)級(jí)50GRT

NCI-H292(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(1S 2S 3R 5S)-(+)-蒎烷二醇 99% (1S,2S,3R,5S)-(+)-2,3-Pincnqdiol 18680-7-8

Promocell C-26001 Renal Epithelial Cell GrowthMedium , 腎上皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基(即用型) 500ml流化 LqcD(II) SULFIDq 1314-87-0

間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基MSCM-acf-prfGlyceroltrioleate甘油三油酸醋5克BR，97%

PTPN2 Others Human 人 PTPN2 / TC-PTP (aa 1-314) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 120-83-22,4-二錄酚2,4-Dichloropxenol
豬內(nèi)皮細(xì)胞;ZYM-SVEC01遠(yuǎn)志口山酮；遠(yuǎn)志山酮IIIPolygalaxanthone III質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CCDC134 Others Human 人 CCDC134 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 雷公藤定堿Wtlfordine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

透明質(zhì)酸酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL三正丁基十四烷基氯化膦Tributyltetradecylphosphonium chloride質(zhì)量規(guī)格：50%grade

BGC-823人胃腺癌細(xì)胞(低分化) BGC-823 human gasic cancer cells (poorly differeiated) 1640+10% FBS羅漢果皂苷ⅢA1mogroside ⅢA1 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

IL4 Protein Human 重組人 IL4 / Ierleukin-4 蛋白羅漢果皂苷ⅡA2mogroside II A2質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
李斯特菌通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒人巨細(xì)胞細(xì)胞株;Mo7e膽甲基碳酸酯(>80.0%(GC))Cholesterol Methyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：>80.0%(GC)

TNFRSF1B Others Human 人 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B (aa 1-268, 196 Met/Arg) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 膽乙基碳酸酯(>94.0%(GC))Cholesterol Ethyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：>94.0%(GC)

mCF, 小鼠成纖維細(xì)胞膽異丙基碳酸酯(>95.0%(GC))Cholesterol Isopropyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)

NIH3T3細(xì)胞，NIH SWISS小鼠胚細(xì)胞 人細(xì)胞,ALVA細(xì)胞 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞RNAHASMC miRNA5 μg膽丁基碳酸酯Cholesterol Butyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：

恒河猴腎細(xì)胞;RM-2膽異丁基碳酸酯Cholesterol Isobutyl Carbonate質(zhì)量規(guī)格：

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。