產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱：利什曼原蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Leishmania spp.
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

PCR實驗方法步驟：
利什曼原蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
SD大鼠脂肪間質(zhì)干細(xì)胞 SD rat adipose mesenchymal stem cells5-尿苷三嶙酸四鈉鹽25克

BT-325細(xì)胞，人神經(jīng)細(xì)胞 空腸彎曲菌 人胚皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-ESF-1α-基-4-羥基肉桂酸 α-Cyano-4-hydroxycinnamic acid,≥98% 28166-41-8 1G 通用試劑

SNU-5(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2L(-)-巖藻糖 L-FUCOSq 438-80-4

Hep G2(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0442SK-NEP-1(人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 人胚胎肌肉組織來源細(xì)胞;CCC-HSM-2麗春紅S100克

人細(xì)胞;SF1269001-22-3β-葡萄糖苷酶　杏仁 (+4℃)BETA-GLUCOSIDASE
組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml甘酰-L-谷酰，英文名或英文縮寫：Glycyl-L-glutamine，級別：BR，99%，規(guī)格：1克

IL4R Others Rat 大鼠 IL4R / Il4ra 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) BOC-S-Trityl-L-半... Boc-Cys(Trt)-OH,97% 21947-98-8 1G 通用試劑

人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-30鐵蛋柏(2-8℃) FqRRITIN, HUMcN 9007-73-

OS-RC-2細(xì)胞，人細(xì)胞 小鼠細(xì)胞,CT-26.WT細(xì)胞 CL-0194RF/6A(猴視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×23-Fluorobenzdehyde間扶25克CP

V79(倉鼠肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21667-99-8媒染蘭 29Mordant Blue 29
CHOdhfr細(xì)胞，二氫葉酸缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞 人癌細(xì)胞系,1590細(xì)胞 人星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HAL正(Standard for GC,>99.5%(GC))1-Hexanol質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,>99.5%(GC)

猴腎細(xì)胞;vero IgRCD4-正(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.8%(GC))1-Hexanol質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.8%(GC)

IL12A Others Human 人 IL12A / NKSF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 十六醇(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))1-Hexadecanol質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)

豬腎細(xì)胞;LLC-PK11,6-己二醇(standard for GC)1,6-Hexanediol質(zhì)量規(guī)格：standard for GC

ERBB4 Others Rat 大鼠 HER4 / ErbB4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 十七烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC))Heptadecane質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)
利什曼原蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒MKN-45細(xì)胞，人低分化細(xì)胞 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,BE(2)C細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2氘代DMSO-D6(10 g )Dimethyl Sulfoxide-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.9%

CRFK(貓腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2氘代DMSO-D6(50 g )Dimethyl Sulfoxide-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.8%+TMS 0.03%

CA10 Others Human 人 CA10 / CARPX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氘代DMSO-D6(50 g )Dimethyl Sulfoxide-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.9%

人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN氘代DMSO-D6(100g )Dimethyl Sulfoxide-D6質(zhì)量規(guī)格：D,99.8%

NRN1 Others Human 人 NRN1 / Neuritin 1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙酸銨(色譜級)Ammonium acetate質(zhì)量規(guī)格：for HPLC,≥99.0%