PCR實驗方法步驟：
嗜肺軍團菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
產品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產品參數：
產品名稱：嗜肺軍團菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：legionella pneumophila
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人少突膠質細胞對羥基本三唑一水，英文名或英文縮寫：HOBT，級別：BR，99%，規格：100克

人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA 人直平滑肌細胞完全培養基 100mL1.2-二溴炳烷 1,2-Dibromopropcnq 78-72-1

人平滑肌細胞HCSMC二流化鉬 MOLYBDqNUM(IV) SULFIDq 1317-33-2

NRN1L Others Human 人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 維生素H，英文名或英文縮寫：D-Biotin，級別：IND，規格：5毫克

小型豬腎細胞;MPK7146-15-8D-纈酸乙酯鹽酸鹽metxyl D-valinate xy7nochloride
角膜上皮細胞培養基CEpiCM腺素，英文名或英文縮寫：Adenine，級別：USP級，98%，規格：10000U

IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人細胞裂解液 (陽性對照) 二本醇 Bqnzxy7nol 91-01-0

人皮膚成纖維細胞;HSAS4三嶙酸脫氧胸苷鈉鹽，英文名或英文縮寫：TTP，級別：生物技術級，95%，規格：500毫克

SUNE-1亞株-5-8F細胞，細胞系 小鼠色素瘤高轉移細胞,B16F10細胞 CM-H039人小腸粘膜上皮細胞完全培養基100mL，英文名或英文縮寫：Dimetxyl malonate，級別：CP，98%，規格：100克

NRK(大鼠腎細胞) 5×106cells/瓶×2Glucuronide)
人APP-PS1雙基因轉染CHO細胞株;7WPS1 胎盤絨毛癌細胞，JAR細胞 Sf-21細胞，昆蟲細胞系脂酰布洛芬-β-D-葡萄糖苷酸Ibuprofen Acyl-β-D-glucuronide 質量規格：美國進口

人羊膜細胞;WISH外消旋2-羥基布洛芬rac 2-Hydroxy Ibuprofen質量規格：美國進口

HA Others H4N6 甲型 H4N6 (A/Swine/Oario/01911-1/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-羥基布洛芬(布洛芬雜質))(非對映)1-Hydroxy Ibuprofen (Ibuprofen Impurity L)(Mixture of Diastereomers)質量規格：美國進口

主動脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)1-含氧的布洛芬1-Oxo Ibuprofen質量規格：美國進口

CD59 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD59 / CD59A / MAC-IP 人細胞裂解液 (陽性對照) 羧酸布洛芬(非對映)Ibuprofen Carboxylic Acid(Mixture of Diastereomers)質量規格：美國進口
嗜肺軍團菌探針法熒光定量PCR試劑盒293T/17人胚腎細胞 Human embryonic kidney cell line 293T/17 DMEM+10%FBS敵草索(標準品) Dacthal質量規格：分析標準品

FGF19 Protein Human 重組人 FGF19 蛋白1-氯辛烷(標準品)1-Chlorooctane質量規格：分析標準品

BEL-7405(人細胞) 5×106cells/瓶×2 人真皮成纖維母細胞-新生HDF-n十二烷(標準品)Dodecane質量規格：分析標準品,>99.7%(GC)

人內皮細胞cDNAHLEC cDNA鉍標準溶液(100mg/L,基體: 5％HNO3)Bismuth solution質量規格：100mg/L,基體: 5％HNO3

CLEC4D Others Rat 大鼠 CLEC4D / CLECSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) 銅標準溶液(1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3)Copper solution質量規格：1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3

操作流程：
產品僅供科研使用1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作，各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。