PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
克雷伯菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：克雷伯菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Klebsiella spp.
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
HPMEC-c 人肺微內(nèi)皮細(xì)胞(HPMEC) 500,000cells 腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)3-去氮腺嘌呤質(zhì)量規(guī)格：美國原裝進(jìn)口，97%3-Deazaneplanocin A HCl salt

神經(jīng)元生長添加物NGS4-氧代維甲酰酚胺質(zhì)量規(guī)格：美國原裝進(jìn)口3-Keto Fenretinide

CA9 Others Canine 狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 4-表米諾環(huán)素質(zhì)量規(guī)格：美國原裝進(jìn)口4-Epi Minocycline

大鼠氣管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL牛磺脫氧膽酸鈉質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRTaurodeoxycholic acid  salt

F81細(xì)胞，貓腎細(xì)胞 NCI-H838 [H838](人細(xì)胞) 散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21rU亞1酰胺單體質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRrU Phosphoramidite
人腎透明細(xì)胞癌;Caki-1SaikosaponinB1柴胡皂甙B1100克BR，粘度200 mpe.s

NK-92細(xì)胞，人惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞 人細(xì)胞系,Hep-3B細(xì)胞 CL-0184PANC-1(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2N.N-二基-1.3-炳二安 3-Diqthylcminopropylcminq 104-78-9

中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24ProcyanidinB2原矢車菊素B2500ulAR，99%

SLAMF1 Others Human 人 CD150 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 甲基綠shēng huà shì jì容量：1公斤

平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)98-67-9固化劑4-xy7noxybenzenesulfonic acid
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KM9801 人脈絡(luò)膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL紫花前胡苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Nodakenin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基TM-prf紫蓳靈（標(biāo)準(zhǔn)品）Corynoline質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

EPO Others Mouse 小鼠 Erythropoietin / EPO 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 紫云英苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Astragaline質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL棕櫚酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Palmitic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CV-1細(xì)胞，非洲綠猴腎細(xì)胞 HPAC(人細(xì)胞) CM-H010人小氣道上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL王不留行黃酮苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Vaccarin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
克雷伯菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒Hepa 1-6(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0458U-118 MG(人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2 人胎兒胸腺細(xì)胞株;HFT-8810 [HFT8810]地塞米,氟美（標(biāo)準(zhǔn)品）Dexamethasone質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人卵巢;PA-1鹽酸地爾硫卓Diltiazem HCL 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

NCAM1 Others Rat 大鼠 NCAM1 / CD56 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸地爾硫卓(標(biāo)準(zhǔn)品)Diltiazem HCL 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定，標(biāo)準(zhǔn)品

CL-0433RWPE-2(人正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×2地美司鈉Dimesna 質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口

SL-7細(xì)胞，胚肺細(xì)胞 人上皮細(xì)胞,RWPE2細(xì)胞 人上皮細(xì)胞;MCF-10A甲磺酸多拉司瓊Dolasetron mesylate 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

操作流程：
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。