PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
布魯氏桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：布魯氏桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Brucella spp.
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
羊促黃體激素(LH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Pioglitazone   中文名：鹽酸吡格列酮  分子式：C19H21ClN2O3S 

羊雌三醇(E3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Pioglitazone   112529-15-4  中文名：鹽酸吡格列酮  分子式：C19H21ClN2O3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

羊雌激素(E)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Pioglitazone   112529-15-4  中文名：鹽酸吡格列酮  分子式：C19H21ClN2O3S 

鹽酸甜菜堿   100g  Pilosol A  中文名：  分子式：C13H12O  度：%

鹽酸克倫特羅檢測(cè)試紙條   Detection of clenberol sip  Pidotimod  中文名：匹多莫德  分子式：C9H12N2O4S  度：98.0%
Anthraglycoside B  中文名：大黃素-8-O-葡萄糖苷  分子式：C21H20O10    總0測(cè)定試劑盒   Total  determination kit

Anthraflavic acid  中文名：二羥蒽醌  分子式：C14H8O4    砷快速測(cè)定試劑盒   Arsenic rapid determination kit

Annonacin  中文名：  分子式：C35H64O7    亞鹽測(cè)定試劑盒   Sulfite determination kit              

Androstenone hydrazone  中文名：雄酮腙  分子式：C19H30N2O    總抗氧化能力（T－AOC）檢測(cè)   Total aioxida capacity (AOC - T) detection

Androstenedione  中文名：雄烯二酮  分子式：C19H26O2    羥自由基檢測(cè)   Hydroxyl radical detection
兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one  43200-81-3  中文名：  分子式：C11H7ClN4O2 

兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  5α-Androstanedione  846-46-8  中文名：5α-雄甾烷二酮  分子式：C19H28O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5α-Androstanedione  中文名：5α-雄甾烷二酮  分子式：C19H28O2  度：98.0%

兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  5α-Androstanedione  846-46-8  中文名：5α-雄甾烷二酮  分子式：C19H28O2 

兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-Chloroguanine riboside  2004/7/1  中文名：6-氯鳥嘌呤核苷  分子式：C10H12ClN5O4
布魯氏桿菌屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒2-(7-Methoxy-1-naphthyl)ethylamine   中文名：  分子式：C13H16ClNO  度：98.0%  兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T            

Ranitidine   中文名：鹽酸雷尼替丁  分子式：C13H23ClN4O3S  度：98.0%  兔子纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Ranitidine  中文名：雷尼替丁  分子式：C13H22N4O3S  度：98.0%  兔子細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Trazodone   中文名：鹽酸曲唑酮  分子式：C19H23Cl2N5O  度：98.0%  兔子細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

N-(Quinoxalin-2-yl)-4-(quinoxalin-2-ylamino)benzenesulfonamide  中文名：  分子式：C22H16N6O2S  度：98.0%  兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

操作流程：
1. 整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。