PCR實驗方法步驟：
化膿放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱：化膿放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Actinomyces pyogenes
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年

注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
轉(zhuǎn)錄因子AP-1   英文名稱：   anscription Factors AP-1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   AP-1  n-Octylbenzene  中文名：  分子式：C14H22 

轉(zhuǎn)錄因子 AP-1(AP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Amprolium   137-88-2  中文名：鹽酸氨丙林  分子式：C14H20Cl2N4 

轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白   英文名稱：   Human ansthyretin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   T  Ritonavir  155213-67-5  中文名：利托那韋  分子式：C37H48N6O5S2  度：98.0%   

轉(zhuǎn)基因植物TE基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T                 Ropivacaine   98717-15-8  中文名：鹽酸羅哌卡因  分子式：C17H27ClN2O 

轉(zhuǎn)基因植物Sad1基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  Rosiglitazone maleate  中文名：馬來酸羅格列酮  分子式：C22H23N3O7S
Stigmasta-4,22,25-trien-3-one  中文名：  分子式：C29H44O    Aipain,Di   1g              

Stigmast-5-ene-3β,7α,16β-triol  中文名：  分子式：C29H50O3    植物25羥基維生素D3elisa試劑盒   植物25羥基維生素D3試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   植物25羥基維生素D3試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：植物25羥基維生素D3試劑盒、植物25羥基維生素D3eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Stigmast-4-ene-3β,6β-diol  中文名：豆甾-4-烯-3β,6β-二醇  分子式：C29H50O2    魚孕激素elisa試劑盒   魚孕激素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   魚孕激素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：魚孕激素試劑盒、魚孕激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Stigmast-4-ene-3,6-dione  中文名：豆甾-4-烯-3,6-二酮  分子式：C29H46O2    魚類狀腺原酸elisa試劑盒   魚類狀腺原酸試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   魚類狀腺原酸試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：魚類狀腺原酸試劑盒、魚類狀腺原酸eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Stellasterol  中文名：星魚甾醇  分子式：C28H46O    魚類皮質(zhì)醇elisa試劑盒   魚類皮質(zhì)醇試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   魚類皮質(zhì)醇試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：魚類皮質(zhì)醇試劑盒、魚類皮質(zhì)醇eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。
小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽elisa試劑盒   小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽試劑盒、小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Lansoprazole  中文名：蘭索拉唑  分子式：C16H14F3N3O2S 

小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] sulfone  27205-03-4  中文名：雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]砜  分子式：C16H18O6S 

小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Epirengynic acid  1310146-00-9  中文名：  分子式：C8H14O4 

小鼠Ⅰ型膠原N末端肽elisa試劑盒   小鼠Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠Ⅰ型膠原N末端肽試劑盒、小鼠Ⅰ型膠原N末端肽eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Lansoprazole  103577-45-3  中文名：蘭索拉唑  分子式：C16H14F3N3O2S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠Ⅰ型膠原N末端肽(X)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Bathophenanthroline  中文名：紅菲繞啉  分子式：C24H16N2
化膿放線菌探針法熒光定量PCR試劑盒1-Benzylimidazole  中文名：1-芐基咪唑  分子式：C10H10N2  度：98.0%  小鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

N4-Benzoylcytosine  中文名：N4-苯甲酰基胞嘧啶  分子式：C11H9N3O2  度：98.0%  小鼠表面膜球蛋白A(mIgA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Benzyl 2,4-dihydroxyphenyl ketone  中文名：2,4-二羥基苯基芐酮  分子式：C14H12O3  度：98.0%  小鼠交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate  中文名：N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸-5-芐酯  分子式：C17H23NO6  度：98.0%  小鼠表皮生長因子(mouse EGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

N6-Benzyladenine  中文名：N6-芐基腺嘌呤  分子式：C12H11N5  度：98.0%  小鼠表皮生長因子受體(mouse EGF R)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

操作流程：
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。