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    幼蟲芽胞桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒樣品RNA的抽提

    發表時間:2022-09-27
    幼蟲芽胞桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒樣品RNA的抽提:
    ①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
    ②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
    ④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
    ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
    ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。
    2 RNA質量檢測
    1)紫外吸收法測定
    先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
    ① 濃度測定

    A260下讀值為1表示40 g RNA/ml。樣品RNA濃度(g/ml)計算公式為:A260 ×稀釋倍數× 40 g/ml。

    自噬相關蛋白1抗體
    β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16 抗體
    腺瘤性息肉調節蛋白抗體
    銜接因子蛋白含pH域蛋白1抗體
    水通道蛋白-7抗體
    谷丙氨酸氨基轉移酶1抗體
    p21活化蛋白激酶ARHG7抗體
    磷酸化肌動蛋白結合蛋白Girdin抗體
    2-氨基乙硫醇雙加氧酶抗體
    血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體
    腺苷A2b受體/神經生長因子1受體抗體
    去整合素樣金屬蛋白酶19抗體
    原癌基因AF4蛋白抗體
    整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶樣1蛋白抗體
    整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶樣2蛋白抗體
    整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶樣3蛋白抗體
    去整合素樣金屬蛋白酶20抗體
    去整合素樣金屬蛋白酶23抗體
    去整合素樣金屬蛋白酶28抗體
    去整合素樣金屬蛋白酶32抗體
    整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶樣4蛋白抗體
    膜粘連蛋白9抗體
    整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶15型抗體
    整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶2型抗體
    整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶8型抗體
    整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶9型抗體


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